Microscopia é o ato de observar pequenas estruturas em um aparelho, de forma a aumenta-la de modo que possamos observar minusculos detalhes e parte da composição.
Existem diversos tipos de microscopia, entre elas podemos citar:
1- Microscopia Optica;
2- Microscopia Eletronica de Transmissão;
3- Microscopia de Varredura;
Que se diferenciam pelo metodo em que se baseia a formação de cada tipo de imagem. Vejamos:
A formação da imagem na microscopia optica se baseia no fato de a luz atravessar a estrutura e um sistema de lentes, até a formação da imagem final.
Microscopia eletrônica de transmissão forma-se uma imagem bidimensional do interior desta sobre uma tela, pela passagem de um o feixe de elétrons através de cortes extremamente finos da amostra. A imagem é formada diretamente a partir da impressão do feixe de elétrons na tela de observação,após a passagem pela amostra (Melo, 2002).
Microscopia eletronica de Varredura este aparelho forma uma imagem tridimensional da superfície de amostras não seccionadas e a imagem é visualizada em um monitor acoplado ao microscópio, nesse caso, os elétrons “varrem” apenas a superfície externa do material biológico (Melo, 2002)
E na diferença da preparação de materiais. Vejamos
Como o material deve ser preparado na microscopia optica:
Escolher uma parte do fármaco em boas condições;
• Quando o material for muito rígido, reidratá-lo ou fervê-lo em água;
• Quando muito flexível, incluí-lo em suporte;
• Fazer cortes finos na direção desejada (transversal, longitudinal) com gilete;
• Receber os cortes em vidro-de-relógio contendo água;
• Selecionar os cortes mais finos (diversos) e transportá-los com auxílio de pincel
para lâmina contendo 1-2 gotas de solução de cloral hidratado;
• Cobrir com lamínula e aquecer cuidadosamente na chama;1 Inclinar 45ºC para
permitir a saída de bolhas, não ferver e repor o diafanizador evaporado;
• Após diafanizar, limpar o excesso do líquido diafanizador com papel de filtro, não
se esquecendo de limpar por baixo da lâmina. Observar que todo o espaço sob a
lamínula esteja preenchido com diafanizador ou corante.
• Caso necessário, substituir o diafanizador por corante;
• Examinar ao microscópio.
Microscopia eletrônica de transmissão.
As amostras utilizadas em MET devem ter as seguintes características: espessura de 500 a
5000Å e superfície polida e limpa dos dois lados. Durante a preparação, a amostra
não deve ser alterada, como por exemplo, através de deformação plástica, difusão de hidrogênio
durante o polimento eletrolítico ou transformações martensíticas.
O microscópio eletrônico de varredura (MEV)
Forma imagens essencialmente tri-dimensionais e de grande efeito plástico, com uma notável profundidade de foco. Estas imagens são produzidas através da interação inicial de um feixe de elétrons com a amostra, que é mantida sob condições de alto vácuo.
Os métodos de preparo visam justamente contornar ou minimizar estas condições adversas, tornando as amostras resistentes e condutoras. Assim se pode dizer que o sucesso de uma boa preparação é fundamental para se garantir a melhor imagem.
As aplicações da microscopia eletrônica de varredura em biologia incluem desde objetos macroscópicos (organismos inteiros, partes vegetais, órgãos isolados, capilares, células de cultura) até o estudo de macromoléculas orgânicas, frações celulares, etc.
Jéssica Natalie
E
Ronaldo Ferreira Fonseca
http://anatpat.unicamp.br/bineucortexnlme.html
